Co NTA Beads 6FF可以從原核和真核表達系統中一步純化His標簽蛋白。該產品是以高度交聯的6%瓊脂糖凝膠為基質,配體以四配位鍵螯合鈷。Co NTA Beads 6FF相比Ni NTA Beads 6FF對His標簽蛋白具有更高的選擇性。具體性能見表1。
表1. Co NTA Beads 6FF的產品性能
性能
指標
基質
高度交聯的6%瓊脂糖凝膠
螯合離子
Co2+
載量(/mL基質)
>20mg 6╳His-tagged protein
微球粒徑(μm)
45–165
最大壓力
0.3 MPa, 3 bar
儲存緩沖液
含20% 乙醇的1XPBS
儲存溫度
4°C-30°C
Co NTA Beads 6FF可以耐受一定范圍的變性劑和其他的添加劑,如表2。
表2. Co NTA Beads 6FF試劑耐受情況
試劑種類
濃度
還原劑
10 mM β-mercaptoethanol1
變性劑
8 M urea
6 M Gua-HCl
去污劑
1% Triton™ X-100
1% NP-40
1% CHAPS ,SDS, sarcosyl
其他類
500 mM imidazole 2
30% ethanol3
20% glycerol
500 mM KCl
1.0 M NaCl
Note:
1.不要將介質保存在含有β-Mercaptoethanol的緩沖液中。
2.過高濃度的咪唑有可能會降低蛋白回收率。
3.乙醇有可能造成蛋白沉淀,降低蛋白回收率和堵柱子。
避免使用下列試劑:DTT (dithiothreitol), DTE (dithioerythritol) and TCEP (TRIS (2-carboxyethyl) phosphine).會降低介質的蛋白載量。
EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) 、 EGTA (ethylene Glycolbis ([β-amino-ethyl ether])會將鈷離子從介質上剝落。
名稱
貨號
規格
Co NTA Beads
SA037005
SA037025
SA037100
SA037500
SA03701L
SA03710L
5ml
25ml
100ml
500ml
1L
10L
Co NTA Beads 6FF
SA038005
SA038025
SA038100
SA038500
SA03801L
SA03810L
HisCap Co 6FF
SA038C11
SA038C15
SA038C51
SA038C55
SA038CS
1X1ml
1X5ml
5x1ml
5X5ml
3X1ml+1x5ml