BCA Protein Assay Kit是目前世界上最常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一。BCA蛋白質定量包括兩步反應:首先,二價銅離子(Cu2+)在堿性條件下被蛋白質的肽鍵還原成一價銅離子(Cu+);其次,兩個分子的BCA絡合一個一價銅離子(Cu+),形成一種在562nm處有強吸收值的紫色復合物,而復合物的吸收值與蛋白的濃度在一定范圍內呈線性相關(如圖)。
使用BCA法進行蛋白質定量有以下特點:1.不受蛋白種類的影響,在20-2000μg/mL濃度范圍內有較好的線性。2.表面活性劑對濃度檢測的干擾較小。但由于還原劑和螯合劑對反應有阻礙,因此本制品不適用于含有還原劑或者螯合劑的蛋白質樣品的定量。
表1是試劑盒的基本組成,我們提供兩種檢測方案:試管和微孔板。試管方案所需樣品量較大(0.1ml),但樣品和工作液的稀釋比例為1:20(V/V),所以干擾物的影響比較;微孔板方案所需的工作液較少(200ul),樣品體積少(25ul),但樣品和工作液的稀釋比例為1:8(V/V),對干擾物的耐受較差。
相關試劑耐受表:
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BCA Protein Assay Kit
SLR01201
250次
SLR01202
1250次